做過(guò)小鼠實(shí)驗(yàn)的人都知道，最磨人的往往不是實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，而是那些防不勝防的「意外」：

場(chǎng)景一：母鼠吃仔

好不容易等到條件性敲除母鼠產(chǎn)下一窩幼崽，第二天卻只剩兩只——只因手上殘留的消毒劑氣味，讓母鼠「不認(rèn)親崽」，直接吃掉了自己的后代。

場(chǎng)景二：Cre 品系選錯(cuò)

拿到 flox 小鼠后，興沖沖地配了全身性 Cre 工具鼠，結(jié)果發(fā)現(xiàn)目的基因在全身被敲除，小鼠胚胎期就死亡了。原來(lái)應(yīng)該選組織特異性 Cre 或誘導(dǎo)型 CreERT2，而不是全身性 Cre。

場(chǎng)景三：PCR 對(duì)照缺失的「烏龍」

跑 PCR 鑒定基因敲除小鼠基因型，只跑了樣品孔，沒(méi)設(shè)空白對(duì)照和陽(yáng)性對(duì)照。結(jié)果某些樣本出現(xiàn)一條微弱條帶，分不清是真實(shí)擴(kuò)增還是氣溶膠污染。

那些不起眼的基因工程小鼠繁育與鑒定細(xì)節(jié)，往往在你毫無(wú)防備時(shí)，悄悄拖慢整個(gè)課題的進(jìn)度。如果你也曾為此頭疼，如果你也想高效篩選品系、避開(kāi)小鼠吃仔的「雷區(qū)」，并掌握 Cre-loxP 系統(tǒng)選擇、基因型鑒定技巧等硬核知識(shí)。參加藥康生物「小鼠答題挑戰(zhàn)賽」，既能快速掌握實(shí)戰(zhàn)技巧，還有機(jī)會(huì)贏取小愛(ài)音響、藍(lán)牙鍵盤(pán)、小米背包、手持風(fēng)扇等 150 份精美好禮！（答案都在文中 or 品牌日頁(yè)面內(nèi)）

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細(xì)節(jié)決定成敗，以下四條實(shí)操干貨，建議收藏

干貨一：母鼠吃仔的「防吃清單」

生產(chǎn)前后三天不換籠：新生仔氣味敏感，換籠會(huì)破壞熟悉環(huán)境，增加母鼠焦慮。

手上別帶「異味」：接觸母鼠或仔鼠前，用籠內(nèi)墊料搓一下手套，覆蓋外來(lái)氣味。

補(bǔ)充「月子營(yíng)養(yǎng)」：每只母鼠每天可喂 1～2 顆瓜子或少量堅(jiān)果，提高泌乳質(zhì)量，減少吃仔。

必要時(shí)請(qǐng)「代乳」：提前準(zhǔn)備母性好的同期哺乳母鼠，將需代乳仔鼠涂抹代乳鼠籠內(nèi)的墊料或尿液，再放入。

干貨二：Cre 工具鼠選型

全身性 Cre：在全身所有組織細(xì)胞中表達(dá)，若靶基因?qū)Πl(fā)育必需，可能導(dǎo)致胚胎期或圍產(chǎn)期死亡。

組織特異性 Cre：僅在特定組織（如肝、腦、T 細(xì)胞）表達(dá)，適合研究基因在特定器官的功能。

誘導(dǎo)型 Cre（如 CreERT2）：需注射他莫昔芬才入核發(fā)揮作用，可實(shí)現(xiàn)時(shí)空特異性敲除，避免胚胎致死。

干貨三：PCR 鑒定必設(shè)的三種對(duì)照

空白對(duì)照（以水代替 DNA 模板）：檢測(cè)試劑、耗材及環(huán)境是否存在核酸污染。若空白出現(xiàn)條帶，說(shuō)明有氣溶膠污染。

陰性對(duì)照（已知野生型小鼠 DNA）：確認(rèn)野生型條帶大小是否符合預(yù)期，并監(jiān)測(cè)擴(kuò)增特異性。

陽(yáng)性對(duì)照（已知雜合子或純合子 DNA）：確認(rèn) PCR 體系工作正常，避免假陰性。

小提示：三類對(duì)照缺一不可，否則出現(xiàn)異常條帶時(shí)無(wú)法快速定位問(wèn)題，白白浪費(fèi)時(shí)間。

干貨四：小鼠常用編號(hào)方式「三選一」

斷趾法（適用 5～7 日齡幼仔）：剪趾位置在遠(yuǎn)側(cè)指骨與中側(cè)指骨關(guān)節(jié)處，用鋒利器械減少應(yīng)激。優(yōu)點(diǎn)：編號(hào)永久清晰；缺點(diǎn)：不適合敗血癥、關(guān)節(jié)炎模型或抓力測(cè)試等實(shí)驗(yàn)。

耳緣打孔法（適用成年小鼠）：左耳代表十位數(shù)，右耳代表個(gè)位數(shù)，用耳標(biāo)器或手術(shù)剪做出缺口。注意：耳朵可能愈合或打架撕裂，需定期檢查。

耳標(biāo)法（適用成年小鼠）：將帶數(shù)字的耳標(biāo)打入耳朵，操作最快。注意：耳標(biāo)易被同籠小鼠咬掉或自行抓掉，需及時(shí)補(bǔ)打。

關(guān)于藥康生物

江蘇集萃藥康生物科技股份有限公司（科創(chuàng)板代碼：688046）是一家專注于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物小鼠模型研發(fā)、生產(chǎn)及非臨床研究服務(wù)的國(guó)家級(jí)高新技術(shù)企業(yè)，同時(shí)是科技部認(rèn)定的國(guó)家遺傳工程小鼠資源庫(kù)共建單位。依托 CRISPR/Cas9、ES 打靶等在內(nèi)的基因編輯技術(shù)，公司建立了國(guó)際一流的基因修飾動(dòng)物模型研發(fā)平臺(tái)，擁有近 3 萬(wàn)種自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的基因工程小鼠模型品系，其中包括基因敲除/條件性敲除小鼠品系（"斑點(diǎn)鼠計(jì)劃"）、藥靶基因人源化模型、復(fù)雜疾病模型、系列免疫缺陷小鼠品系、無(wú)菌小鼠品系以及用于抗體藥物發(fā)現(xiàn)的 NeoMab? 全人源抗體轉(zhuǎn)基因小鼠，為全球科研機(jī)構(gòu)、CRO 公司及醫(yī)藥企業(yè)提供全面的模型資源支持。

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