浙江
當(dāng)前應(yīng)用最廣泛的基因編輯工具是 CRISPR-Cas9 系統(tǒng)，由兩大核心組件構(gòu)成協(xié)同作用：
Cas9 核酸酶：作為具有特異性切割功能的「分子剪刀」，能夠在目標(biāo)位點(diǎn)精準(zhǔn)斷裂 DNA 雙鏈，形成 DNA 雙鏈斷裂（DSB），為后續(xù)編輯提供基礎(chǔ)。
sgRNA（單導(dǎo) RNA）：作為靶向引導(dǎo)分子，一端通過(guò)堿基互補(bǔ)配對(duì)識(shí)別目標(biāo)基因序列，另一端與 Cas9 酶結(jié)合，引導(dǎo)其高效定位至基因組特定區(qū)域，確保切割的特異性。
下面是基因編輯的關(guān)鍵流程，基因編輯的核心流程可概括為「靶向識(shí)別 - 雙鏈斷裂 - 修復(fù)編輯」三個(gè)關(guān)鍵步驟：
1?? 靶向識(shí)別：sgRNA 通過(guò)序列互補(bǔ)與目標(biāo)基因組位點(diǎn)特異性結(jié)合，引導(dǎo) Cas9 酶形成功能性復(fù)合物，實(shí)現(xiàn)對(duì)編輯位點(diǎn)的精準(zhǔn)定位。
2?? 雙鏈斷裂：Cas9 酶在目標(biāo)位點(diǎn)啟動(dòng)切割功能，斷裂 DNA 雙鏈，觸發(fā)細(xì)胞內(nèi)固有的 DNA 損傷修復(fù)機(jī)制。
3?? 修復(fù)編輯：細(xì)胞主要通過(guò)兩種途徑完成修復(fù)，實(shí)現(xiàn)不同編輯目的：
非同源末端連接（NHEJ）：修復(fù)過(guò)程無(wú)需同源模板，速度快但易產(chǎn)生堿基插入或缺失突變，可導(dǎo)致目標(biāo)基因功能失活，常用于基因敲除。
同源重組修復(fù)（HDR）：需引入攜帶目標(biāo)序列的外源供體 DNA 作為模板，修復(fù)過(guò)程精準(zhǔn)度高，可實(shí)現(xiàn)基因的定點(diǎn)插入、替換或修飾，適用于精準(zhǔn)基因編輯。
編輯：冷漠小 z
內(nèi)容來(lái)源：丁香大師姐
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